(ફ્લો સાયટોમેટ્રી , એફસીએમ) એ સેલ વિશ્લેષક છે જે સ્ટેઇન્ડ સેલ માર્કર્સની ફ્લોરોસેન્સ તીવ્રતાને માપે છે. તે એક ઉચ્ચ કોષોના વિશ્લેષણ અને વર્ગીકરણના આધારે વિકસાવવામાં આવેલ એક ઉચ્ચ તકનીક છે. તે કોષોના કદ, આંતરિક માળખું, ડીએનએ, આરએનએ, પ્રોટીન, એન્ટિજેન્સ અને અન્ય ભૌતિક અથવા રાસાયણિક ગુણધર્મોને ઝડપથી માપી અને વર્ગીકૃત કરી શકે છે અને આ વર્ગીકરણના સંગ્રહ પર આધારિત હોઈ શકે છે.
ફ્લો સાયટોમીટર મુખ્યત્વે નીચેના પાંચ ભાગો ધરાવે છે:
1 ફ્લો ચેમ્બર અને ફ્લુડિક્સ સિસ્ટમ
2 લેસર પ્રકાશ સ્ત્રોત અને બીમ આકાર આપવાની સિસ્ટમ
3 ઓપ્ટિકલ સિસ્ટમ
4 ઇલેક્ટ્રોનિક્સ, સંગ્રહ, પ્રદર્શન અને વિશ્લેષણ સિસ્ટમ
5 સેલ સોર્ટિંગ સિસ્ટમ
તેમાંથી, લેસર પ્રકાશ સ્ત્રોત અને બીમ રચના પ્રણાલીમાં લેસર ઉત્તેજના એ ફ્લો સાયટોમેટ્રીમાં ફ્લોરોસેન્સ સંકેતોનું મુખ્ય માપ છે. ઉત્તેજના પ્રકાશની તીવ્રતા અને એક્સપોઝરનો સમય ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલની તીવ્રતા સાથે સંબંધિત છે. લેસર એક સુસંગત પ્રકાશ સ્ત્રોત છે જે એકલ-તરંગલંબાઇ, ઉચ્ચ-તીવ્રતા અને ઉચ્ચ-સ્થિરતા પ્રકાશ પ્રદાન કરી શકે છે. આ આવશ્યકતાઓને પૂર્ણ કરવા માટે તે આદર્શ ઉત્તેજના પ્રકાશ સ્ત્રોત છે.
લેસર સ્ત્રોત અને ફ્લો ચેમ્બર વચ્ચે બે નળાકાર લેન્સ છે. આ લેન્સ નાના ક્રોસ-સેક્શન (22 μm × 66 μm) સાથે લંબગોળ બીમમાં લેસર સ્ત્રોતમાંથી ઉત્સર્જિત ગોળાકાર ક્રોસ-સેક્શન સાથે લેસર બીમ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરે છે. આ લંબગોળ બીમની અંદરની લેસર ઉર્જા સામાન્ય વિતરણ અનુસાર વિતરિત કરવામાં આવે છે, જે લેસર શોધ વિસ્તારમાંથી પસાર થતા કોષો માટે સતત પ્રકાશની તીવ્રતા સુનિશ્ચિત કરે છે. બીજી તરફ, ઓપ્ટિકલ સિસ્ટમમાં લેન્સ, પિનહોલ્સ અને ફિલ્ટર્સના બહુવિધ સેટનો સમાવેશ થાય છે, જેને આશરે બે જૂથોમાં વિભાજિત કરી શકાય છે: ફ્લો ચેમ્બરની અપસ્ટ્રીમ અને ડાઉનસ્ટ્રીમ.
ફ્લો ચેમ્બરની સામેની ઓપ્ટિકલ સિસ્ટમમાં લેન્સ અને પિનહોલનો સમાવેશ થાય છે. લેન્સ અને પિનહોલ (સામાન્ય રીતે બે લેન્સ અને એક પિનહોલ) નું મુખ્ય કાર્ય લેસર સ્ત્રોત દ્વારા ઉત્સર્જિત ગોળાકાર ક્રોસ-સેક્શન સાથે લેસર બીમને નાના ક્રોસ-સેક્શન સાથે લંબગોળ બીમમાં કેન્દ્રિત કરવાનું છે. આ લેસર ઉર્જાને સામાન્ય વિતરણ અનુસાર વિતરિત કરે છે, સમગ્ર લેસર શોધ વિસ્તારના કોષો માટે સતત પ્રકાશની તીવ્રતા સુનિશ્ચિત કરે છે અને છૂટાછવાયા પ્રકાશમાંથી દખલ ઘટાડે છે.
ફિલ્ટર્સના ત્રણ મુખ્ય પ્રકારો છે:
1: લોંગ પાસ ફિલ્ટર (LPF) - ચોક્કસ મૂલ્ય કરતાં વધુ તરંગલંબાઇવાળા પ્રકાશને જ પસાર થવા દે છે.
2: શોર્ટ-પાસ ફિલ્ટર (SPF) - માત્ર ચોક્કસ મૂલ્યથી ઓછી તરંગલંબાઇવાળા પ્રકાશને પસાર થવા દે છે.
3: બેન્ડપાસ ફિલ્ટર (BPF) - માત્ર ચોક્કસ તરંગલંબાઇ શ્રેણીમાં પ્રકાશને પસાર થવા દે છે.
ફિલ્ટર્સના વિવિધ સંયોજનો વિવિધ તરંગલંબાઇ પર ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલોને વ્યક્તિગત ફોટોમલ્ટિપ્લાયર ટ્યુબ્સ (PMTs) તરફ દિશામાન કરી શકે છે. ઉદાહરણ તરીકે, પીએમટીની સામે ગ્રીન ફ્લોરોસેન્સ (FITC) શોધવા માટેના ફિલ્ટર્સ LPF550 અને BPF525 છે. PMT ની સામે નારંગી-લાલ ફ્લોરોસેન્સ (PE) શોધવા માટે ઉપયોગમાં લેવાતા ફિલ્ટર્સ LPF600 અને BPF575 છે. PMT ની સામે લાલ ફ્લોરોસેન્સ (CY5) શોધવા માટેના ફિલ્ટર્સ LPF650 અને BPF675 છે.
ફ્લો સાયટોમેટ્રીનો ઉપયોગ મુખ્યત્વે સેલ સોર્ટિંગ માટે થાય છે. કોમ્પ્યુટર ટેકનોલોજીના વિકાસ સાથે, રોગપ્રતિકારક વિજ્ઞાનના વિકાસ અને મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ટેકનોલોજીની શોધ સાથે, જીવવિજ્ઞાન, દવા, ફાર્મસી અને અન્ય ક્ષેત્રોમાં તેનો ઉપયોગ વધુને વધુ વ્યાપક બની રહ્યો છે. આ એપ્લિકેશન્સમાં સેલ ડાયનેમિક્સ એનાલિસિસ, સેલ એપોપ્ટોસિસ, સેલ ટાઈપિંગ, ગાંઠનું નિદાન, દવાની અસરકારકતા વિશ્લેષણ વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.
પોસ્ટ સમય: સપ્ટે-21-2023
